【新品】TEV Protease

储存温度：

TEVProtease(10 U/μl)长期储存于-80℃，可保存2年；或小量分装后保存于-20℃，可保存6个月，避免反复冻融。10×TEVBuffer置于-20℃保存即可。

产品介绍：

TEV Protease (烟草蚀纹病毒蛋白酶；Tobacco etch virus protease) 是来源于烟草蚀纹病毒(TEV) Nla的重组蛋白酶，此蛋白酶被用来切除纯化后融合蛋白的亲和标签。TEV Protease具有很强的位点特异性，能够识别EXXYXQ(G/S)的七氨基酸序列(Glu-Asn-Leu- Tyr-Phe- Gln-Gly)，最普通的是ENLYFQG，其切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸或丝氨酸之间。该酶在PH 5.5-8.5和4-30℃的广泛范围内皆有活性，使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而修改。TEV Protease自大肠杆菌表达经亲和纯化的重组蛋白酶。TEV Protease带有多聚组氨酸标签，酶切反应完毕后可通过亲和层析去除。

酶活性单位定义：

在1×TEV Buffer (50 mM Tris-HCl, pH8.0, 0.5 mMEDTA,1mM DTT) 中，30℃条件下反应1 h，能够切割3 µg的反应底物达85%以上所需的酶量定义为一个活性单位。

应用：融合蛋白标签剪切去除。

操作方法：

若蛋白为热不稳定性，请在4℃孵育较长时间或增加酶的用量。

1.在 EP 管中配置如下反应体系：

2.混匀上述体系后于30℃孵育，在 1、2、4、6小时分别吸出30 μl上述反应液，置于单独的EP管中。

3.向上述EP管中加入20 μl 2×SDS Loading Buffer, 置于-20℃。

4.取30 μl样品进行SDA-PAGE分析。

注意事项：

为达到最好的酶切效果，请保证重组蛋白为部分或完全纯化的蛋白。

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