pcDNA3.1(+) Seamless Cloning Kit
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- 来源:生物科研网
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格(元) | |
CL140-01 | pcDNA3.1(+) Seamless Cloning Kit | 20次 | 1000 |
产品介绍:
pcDNA3.1(+)载体为哺乳动物细胞表达载体,具有人巨细胞病毒(CMV)启动子,在哺乳动物细胞中高水平表达;新霉素抗性基因,用于选择稳定细胞系。本产品提供pcDNA3.1(+)经EcoRⅠ酶切后的线性化载体,可用无缝克隆技术将单个或多个DNA片段组装到载体上。
无缝克隆技术可在重组酶的作用下,只需一步反应,便可将片段克隆到任何载体中的任意位置,得到重组质粒。无缝克隆技术作为一种非常强大的克隆技术,具有快速、简便、高效、多片段组装和定向克隆等特点,用于单个 DNA 片段的克隆,多个 DNA 片段组装克隆以及多位点突变构建等实验目的。
产品特点:
1.pcDNA3.1(+)具有人巨细胞病毒(CMV)启动子,在哺乳动物细胞中高水平表达。
2.pcDNA3.1(+)具有新霉素抗性基因,用于选择稳定细胞系。
3.pcDNA3.1(+)经EcoRⅠ酶切后的线性化载体,省时省力。
4.无缝克隆技术只需要简单的 PCR 扩增就可以制备片段DNA。
5.可以克隆长片段和多片段DNA。
操作步骤:
1.pcDNA3.1(+)线性化载体使用方法:
(1)pcDNA3.1(+)线性化载体当做克隆载体使用,可以在扩增PCR产物的
上游引物 5’端添加序列:TAGGGAGACCCAAGCTGGCTAGCgccacc(gccacc为Kozak序列)
下游引物 5’端添加序列:CACTGTGCTGGATATCTGCAGAATTC
通过无缝克隆连接到pcDNA3.1(+)中。
(2)测序引物
pcDNA3.1-F:CTAGAGAACCCACTGCTTAC |
pcDNA3.1-R(BGH-R):TAGAAGGCACAGTCGAGG
(3) pcDNA3.1(+)线性化载体为 EcoRⅠ酶切后的线性化载体,图谱及多克隆位点见下图。
详情见说明书
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