pET-22b(+) Seamless Cloning Kit

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CL130-01 pET-22b(+) Seamless Cloning Kit 20次 1000


保存条件:-20℃保存一年

产品介绍:

pET-22b(+)载体为高水平的原核表达载体,在N端含有PelB信号肽序列,能够将表达的目的蛋白定位在细胞外周质腔,同时在C端具有His标签。本产品提供pET-22b(+)经EcoRⅠ酶切后的线性化载体,可用无缝克隆技术将单个或多个DNA片段组装到载体上。

无缝克隆技术可在重组酶的作用下,只需一步反应,便可将片段克隆到任何载体中的任意位置,得到重组质粒。无缝克隆技术作为一种非常强大的克隆技术,具有快速、 简便、高效、多片段组装和定向克隆等特点,用于单个 DNA 片段的克隆,多个 DNA 片段组装克隆以及多位点突变构建等实验目的。

产品特点:

1.pET-22b(+)载体为原核表达载体,具有N-PelB signal seqence和C-His标签。

2.pET-22b(+)经EcoRⅠ酶切后的线性化载体,省时省力。

3.无缝克隆技术只需要简单的 PCR 扩增就可以制备片段DNA。

4.可以克隆长片段和多片段DNA。

5.简单、快速、精确、定向克隆。

操作步骤:

1.pET-22b(+)线性化载体使用方法:

(1)pET-22b(+)线性化载体当做克隆载体使用,可以在扩增PCR产物的

上游引物 5’端添加序列:CGCTGCCCAGCCGGCGATGGCCATG

下游引物 5’端添加序列:CTCAGTGGTGGTGGTGGTGGTGCTCGAG

通过无缝克隆连接到pET-22b(+)中。

(2)测序引物

T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'

T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'

(3)pET-22b(+)线性化载体为 EcoRⅠ酶切后的线性化载体,图谱及多克隆位点见下图。

详情见说明书

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